Qhov Tseem Ceeb Qhov txawv - Flow Cytometry vs FACS
Nyob rau hauv cov ntsiab lus ntawm kev xav ntawm tes, cov hlwb yog cov qauv tsim thiab kev ua haujlwm ntawm txhua yam kabmob. Cell sorting yog ib txoj kev siv los cais cov hlwb sib txawv raws li lub cev thiab morphological nta. Lawv tuaj yeem yog intracellular lossis extracellular yam ntxwv. Kev sib cuam tshuam ntawm DNA, RNA, thiab cov proteins raug suav tias yog cov khoom sib tham sib cuam tshuam hauv lub cev thaum lub cev, qhov loj thiab qhov sib txawv ntawm cov proteins yog suav tias yog cov khoom siv ntxiv. Hauv kev tshawb fawb niaj hnub no, cov txheej txheem kev txheeb xyuas ntawm tes tau coj los pab qhov kev tshawb nrhiav sib txawv hauv kev tshawb fawb txog roj ntsha thiab tseem tsim cov hauv paus ntsiab lus tshiab los ntawm kev tshawb fawb txog tshuaj. Cell sorting yog ua los ntawm ntau yam txheej txheem uas suav nrog ob qho tib si qub nrog cov cuab yeej siv tsawg thiab cov txheej txheem thev naus laus zis siab heev nrog kev siv cov tshuab sophisticated. Flow cytometry, fluorescent activated cell sorting (FACS), magnetic cell sorting thiab single cell sorting yog cov txheej txheem loj siv. Flow cytometry thiab FACS yog tsim los sib txawv ntawm cov hlwb raws li lawv cov khoom kho qhov muag. FACS yog hom tshwj xeeb ntawm kev ntws cytometry. Flow cytometry yog ib txoj hauv kev uas yog siv thaum lub sij hawm kev soj ntsuam ntawm cov pej xeem heterogeneous ntawm cov hlwb raws li cov xov tooj ntawm tes sib txawv molecules, qhov loj thiab ntim uas tso cai rau kev tshawb xyuas ntawm ib lub hlwb. FACS yog txheej txheem los ntawm cov qauv sib xyaw ntawm cov hlwb raug txheeb raws li lawv lub teeb tawg thiab cov yam ntxwv fluorescence rau hauv ob lossis ntau lub thawv. Qhov no yog qhov sib txawv tseem ceeb ntawm flow cytometry thiab FACS.
Flow Cytometry yog dab tsi?
Flow cytometry yog ib txoj hauv kev uas siv los tshuaj xyuas thiab txiav txim siab qhov kev qhia ntawm intracellular molecules thiab lub cell nto thiab los txhais thiab qhia cov yam ntxwv ntawm cov cell sib txawv. Nws kuj yog siv los txiav txim qhov ntim ntawm tes thiab qhov loj ntawm tes thiab ntsuas qhov purity ntawm subpopulations uas yog cais. Qhov no tso cai rau kev ntsuas ntau qhov ntsuas ntawm ib lub hlwb ntawm tib lub sijhawm. Flow cytometry yog siv los ntsuas qhov kev siv ntawm fluorescence uas yog tsim los ntawm fluorescently sau cov tshuaj tiv thaiv uas pab txheeb xyuas cov proteins lossis ligands uas khi rau cov hlwb.
Daim duab 01: Flow Cytometry
Feem ntau, ntws cytometry suav nrog peb lub tshuab ua haujlwm feem ntau. Lawv yog cov fluidics, electronics, thiab optics. Hauv kev khiav cytometry, tsib lub ntsiab tseem ceeb muaj nyob rau hauv uas siv hauv kev txheeb xyuas ntawm tes. Lawv yog, ib tug ndlwg ntawm tes (ib tug kwj ntawm cov kua uas yog siv los thauj lawv thiab dlhos lub hlwb rau optical sensing txheej txheem), ib tug system ntawm kev ntsuas (yuav ua tau ntawm txawv systems xws li, mercury thiab xenon teeb, siab zog dej-txias los yog tsis muaj zog cua txias lasers lossis diode lasers), ADC; Analog rau Digital Converter system, amplification system thiab lub computer rau kev tsom xam. Kev yuav khoom yog cov txheej txheem uas cov ntaub ntawv sau los ntawm cov qauv siv flow cytometer. Cov txheej txheem no yog kho los ntawm lub computer uas txuas nrog lub flow cytometer. Lub software tam sim no nyob rau hauv lub computer soj ntsuam cov ntaub ntawv pub rau lub computer los ntawm cov flow cytometer. Lub software kuj tseem muaj peev xwm kho qhov tsis sib xws ntawm qhov kev sim tswj qhov ntws cytometer.
FACS yog dab tsi?
Nyob rau hauv cov ntsiab lus ntawm Flow cytometry, Fluorescence-activated cell sorting (FACS) yog ib txoj hauv kev uas yog siv rau hauv kev sib txawv thiab kev txheeb xyuas cov qauv ntawm kev sib xyaw ntawm cov hlwb lom. Cov hlwb raug cais los ntawm ob lossis ntau lub thawv. Txoj kev sorting yog raws li lub cev nta ntawm lub cell uas muaj xws li lub teeb tawg thiab fluorescence yam ntxwv ntawm lub cell. Qhov no yog ib qho tseem ceeb ntawm cov txheej txheem tshawb fawb, uas tuaj yeem siv tau kom tau txais txiaj ntsig zoo thiab muaj txiaj ntsig zoo ntawm cov teeb liab fluorescence uas tau tawm ntawm txhua lub xov tooj. Thaum lub sij hawm FACS, thawj zaug, qhov sib xyaw ua ntej ntawm cov hlwb; ib qho kev ncua yog coj mus rau qhov chaw ntawm cov kwj nqaim ntawm cov kua uas ntws nrawm heev. Cov kua dej ntws yog tsim los txhawm rau cais cov hlwb hauv kev ncua raws li txoj kab uas hla ntawm txhua lub cell. Lub tshuab ntawm kev co yog siv rau cov kwj ntawm kev ncua uas ua rau tsim cov tee dej.
Figure 02: FACS
Lub kaw lus tau ntsuas kom tsim tau ib lub tee dej nrog ib lub xovtooj. Tsuas yog ua ntej tsim cov tee dej, cov dej ntws tawm txav mus raws lub ntsuas fluorescence uas pom cov yam ntxwv ntawm fluorescence ntawm txhua lub cell. Thaum lub sij hawm tsim cov tee dej, lub nplhaib hluav taws xob tau muab tso rau hauv lub nplhaib uas muaj qhov cuam tshuam rau lub nplhaib ua ntej ntsuas qhov kev siv ntawm fluorescence. Thaum cov tee dej tau tsim los ntawm cov kwj dej ncua kev kawm, tus nqi raug kaw hauv cov tee dej uas tom qab ntawd nkag mus rau hauv qhov system electrostatic deflection. Raws li tus nqi, lub kaw lus hloov cov tee rau hauv cov thawv sib txawv. Cov txheej txheem ntawm kev siv tus nqi sib txawv raws li cov tshuab sib txawv siv hauv FACS. Cov cuab yeej siv hauv FACS yog lub npe hu ua fluorescence activated cell sorter.
Dab tsi yog qhov zoo sib xws ntawm Flow Cytometry thiab FACS?
Flow cytometry thiab FACS yog tsim los sib txawv ntawm cov hlwb raws li lawv cov khoom kho qhov muag
Qhov txawv ntawm Flow Cytometry thiab FACS yog dab tsi?
Flow Cytometry vs FACS |
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Flow cytometry yog ib txoj hauv kev uas yog siv thaum lub sij hawm kev soj ntsuam ntawm cov neeg heterogeneous ntawm cov hlwb raws li cov xov tooj ntawm tes sib txawv molecules, qhov loj thiab ntim uas tso cai rau kev tshawb xyuas ntawm ib lub hlwb. | FACS yog txheej txheem los ntawm cov qauv sib xyaw ntawm cov hlwb raug txheeb raws li lawv lub teeb tawg thiab cov yam ntxwv fluorescence rau hauv ob lossis ntau lub thawv. |
Summary – Flow Cytometry vs FACS
Lub xovtooj ntawm tes yog cov qauv tsim thiab kev ua haujlwm ntawm txhua yam kabmob muaj sia. Cell sorting yog cov txheej txheem uas cov hlwb raug cais thiab sib txawv rau hauv ntau pawg raws li lawv cov khoom intracellular thiab extracellular. Flow cytometry thiab FACS yog ob txoj hauv kev tseem ceeb hauv kev txheeb xyuas ntawm tes. Ob txheej txheem yog tsim los sib txawv hlwb raws li lawv cov khoom kho qhov muag. Flow cytometry yog ib txoj hauv kev uas yog siv thaum lub sij hawm kev soj ntsuam ntawm cov pej xeem heterogeneous ntawm cov hlwb raws li cov xov tooj ntawm tes sib txawv molecules, qhov loj thiab ntim uas tso cai rau kev tshawb xyuas ntawm ib lub hlwb. FACS yog txheej txheem los ntawm cov qauv sib xyaw ntawm cov hlwb raug txheeb raws li lawv lub teeb tawg thiab cov yam ntxwv fluorescence rau hauv ob lossis ntau lub thawv. Qhov no yog qhov txawv ntawm Flow Cytometry thiab FACS.
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