Qhov sib txawv tseem ceeb ntawm cov nroj tsuag thiab tsiaj DNA rho tawm yog tias hauv cov nroj tsuag DNA rho tawm, nws yog qhov tsim nyog los rhuav tshem cov phab ntsa ntawm tes los ntawm kev sib tsoo cov ntaub so ntswg hauv cov dej khov qhuav lossis kua nitrogen kom tso tawm cov ntsiab lus ntawm tes thaum nyob hauv tsiaj DNA rho tawm., nws tsis tas yuav ua cov kauj ruam no vim tsiaj hlwb tsis muaj phab ntsa ntawm tes.
Genomic DNA yog cov khoom siv caj ces ntawm cov nroj tsuag thiab tsiaj txhu. Genomic DNA yog tshwj xeeb rau txhua tus nroj tsuag lossis tsiaj. Kev rho tawm DNA ntawm cov DNA zoo yog qhov yuav tsum tau ua ua ntej rau kev tshawb fawb molecular. DNA ntawm cov kab mob yog muab rho tawm rau kev txheeb xyuas, kuaj mob ntawm cov kab mob, kuaj pom cov noob caj noob ces thiab cov kab ke, lub hom phiaj forensic, kuaj txiv neej, genome sequencing, thiab kev loj hlob ntawm cov tshuaj, thiab lwm yam. DNA rho tawm txoj kev sib txawv nyob ntawm seb hom cell - seb nws yog tsiaj cell los yog cog cell.
DNA Extraction yog dab tsi?
DNA hauv cov hlwb cog tau muab rho tawm rau ntau yam kev tshawb fawb molecular. Nws yuav tsum tau rho tawm tsis tu ncua, ntshiab genomic DNA. Li no, muaj ntau hom DNA extraction raws tu qauv uas txawv ntawm DNA extraction raws tu qauv los ntawm cov tsiaj hlwb. Qhov no yog vim cov nroj tsuag muaj cov phab ntsa ntawm tes uas yuav tsum tau tawg kom tshem tawm cov ntsiab lus ntawm tes.
Kev rho tawm feem ntau yog ua los ntawm kev sib tsoo cov ntaub so ntswg hauv cov dej khov qhuav lossis kua nitrogen siv cov tshuaj khib nyiab thiab pestle. Tom qab ntawd cov cell membranes raug cuam tshuam, thiab cov ntsiab lus ntawm tes raug coj tawm mus rau hauv qhov kev tshem tawm tsis pub dhau. Qhov no feem ntau yog ua los ntawm cov tshuaj ntxuav tes; SDS (sodium dodecyl sulfate) lossis CTAB (cetyltrimethylammonium bromide) tsis muaj. Cov DNA tso tawm yog tiv thaiv los ntawm endogenous nucleases siv tus neeg sawv cev chelating xws li EDTA. Ntxiv mus, cov proteins raug cais los ntawm DNA siv chloroform lossis phenol.
Daim duab 01: cog DNA Extraction
Nroj tsuag tsim cov polysaccharides thiab polyphenols, suav nrog flavonoids thiab lwm cov metabolites theem nrab. Cov tebchaw no cuam tshuam nrog kev rho tawm ntawm cov genomic DNA ntshiab. Li no, feem ntau cov nroj tsuag DNA extraction raws tu qauv koom nrog lwm cov kauj ruam, xws li cesium chloride density gradient txheej txheem los tshem tawm cov tebchaw.
Feem ntau ntawm cov txheej txheem rho tawm DNA pom zoo siv cov nplooj tshiab rau kev rho tawm DNA. Qee txoj hauv kev tsis suav nrog tshuaj lom neeg xws li kua nitrogen thiab phenol. CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide) raws tu qauv yog cov nroj tsuag nrov DNA extraction raws tu qauv uas pab txhawb cov extraction ntawm cov nroj tsuag zoo genomic DNA. Nws yog ib txoj hauv kev yooj yim, nyab xeeb, txhim khu kev qha, thiab tus nqi tsim nyog rau cog DNA rho tawm. Feem ntau ntawm lwm txoj kev yog hloov kho cov qauv ntawm CTAB txoj kev.
Dab Tsi Yog Dab Tsi?
Nyiaj DNA rho tawm yog kev rho tawm ntawm genomic DNA los ntawm cov tsiaj hlwb rau kev tshuaj xyuas molecular. Tsis zoo li cov nroj tsuag DNA rho tawm, kev tawg ntawm phab ntsa ntawm tes tsis tsim nyog rau cov tsiaj hlwb vim lawv tsis muaj phab ntsa ntawm tes. Cov qe ntshav yog hom tsiaj uas muaj ntau tshaj plaws uas siv rau ntau lub hom phiaj.
Daim duab 02: DNA Extraction
Txoj kev phenol-chloroform yog ib qho kev xaiv zoo tshaj plaws rau cov qe ntshav. Cov txiaj ntsig thiab qhov zoo ntawm DNA yog siab thaum rho DNA los ntawm txoj kev no. Nws yog cov kua-kua DNA extraction raws tu qauv, thiab txoj kev no cais DNA molecules nyob rau hauv lub hauv paus ntawm lawv solubility nyob rau hauv immiscible daws. Phenol, chloroform thiab isoamyl cawv yog peb cov khoom xyaw saum toj kawg nkaus ntawm txoj kev no.
Dab tsi yog qhov zoo sib xws ntawm Nroj Tsuag thiab Tsiaj DNA Extraction?
- Lub sijhawm cog qoob loo thiab tsiaj txhu DNA rho tawm, cell membranes yuav tsum raug cuam tshuam.
- Tus DNA yuav tsum tau tiv thaiv los ntawm endogenous nucleases.
- Ntxiv mus, kev txiav cov DNA yuav tsum tiv thaiv.
- Cov khoom lag luam muaj rau kev rho tawm cov nroj tsuag DNA thiab tsiaj DNA.
- Ntau cov nroj tsuag thiab tsiaj DNA rho tawm txoj kev xav tau kev hloov kho tas mus li thiab tsim qauv.
Qhov txawv ntawm tsob nroj thiab tsiaj DNA Extraction yog dab tsi?
Qhov sib txawv tseem ceeb ntawm cov nroj tsuag thiab tsiaj DNA rho tawm yog tias cog DNA rho tawm yuav tsum tau sib tsoo ntawm cov ntaub so ntswg hauv cov dej khov qhuav los yog kua nitrogen txhawm rau txhawm rau rhuav phab ntsa ntawm tes thaum tsiaj DNA rho tawm tsis tas yuav tsum tau ua cov kauj ruam no txij li thaum lawv tsiaj cell tsis muaj phab ntsa ntawm tes. CTAB txoj kev yog ib txoj hauv kev zoo tshaj plaws rau cog DNA rho tawm thaum txoj kev phenol-chloroform yog ib txoj hauv kev zoo tshaj plaws rau tsiaj DNA extraction.
Hauv qab infographic tabulates qhov sib txawv ntawm cov nroj tsuag thiab tsiaj DNA rho tawm.
Summary – Cog vs Tsiaj DNA Extraction
Ntau txoj hauv kev muaj rau kev rho tawm DNA los ntawm ntau hom cell. Yog li ntawd, cog DNA extraction raws tu qauv txawv ntawm cov tsiaj cell DNA extraction raws tu qauv. Cog DNA extraction yuav tsum muaj kev cuam tshuam ntawm phab ntsa ntawm tes, cell membrane thiab nuclear membrane thaum tsiaj DNA extraction yuav tsum muaj kev puas tsuaj ntawm cell membrane thiab nuclear membrane. Qhov tseem ceeb tshaj, cov tsiaj cell DNA rho tawm tsis tas yuav muaj kev cuam tshuam ntawm phab ntsa ntawm tes los ntawm kev sib tsoo hauv cov dej khov qhuav lossis kua nitrogen. Yog li, qhov no yog qhov sib txawv ntawm cov nroj tsuag thiab tsiaj txhu DNA rho tawm.
