Qhov Tseem Ceeb Qhov Sib Txawv - Thawj Vs Tus Kheej Cov Kabmob Secondary
Ua ntej sib tham txog qhov sib txawv ntawm Lub Tsev Kawm Ntawv Qib Siab thiab Qib Kawm Qib Siab, cia peb ua ntej piav qhia luv luv seb kab lis kev cai ntawm tes yog dab tsi. Cell kab lis kev cai yog cov txheej txheem ntawm kev tshem tawm cov hlwb los ntawm cov tsiaj los yog cov nroj tsuag thiab kev loj hlob tom qab nyob rau hauv ib puag ncig tswj kev tsim khoom. Cov hlwb tuaj yeem raug tshem tawm ncaj qha los ntawm cov ntaub so ntswg thiab disaggregated los ntawm enzymatic los yog mechanical txoj kev los yog yuav muab tau los ntawm ib tug kab lis kev cai uas twb tau tsim. Qhov sib txawv tseem ceeb ntawm cov kab lis kev cai hauv thawj thiab theem nrab yog cov cell rau thawj kab lis kev cai ntawm tes tau txais ncaj qha los ntawm cov tsiaj los yog cov ntaub so ntswg, thaum cov cell rau cov kab lis kev cai thib ob yog tau los ntawm cov kab lis kev cai uas twb tau tsim lawm. Yog li no, kab lis kev cai thib ob yog kab lis kev cai tshiab los ntawm thawj kab lis kev cai.
Cia peb saib ntxiv rau lub ntsiab lus ntawm cov kab lis kev cai ntawm thawj thiab theem nrab ntawm tes txhawm rau txhawm rau sib txawv zoo dua.
Primary Cell Culture yog dab tsi?
Primary cell kab lis kev cai yog kev cuam tshuam ntawm cov hlwb los ntawm niam txiv tsiaj lossis cov ntaub so ntswg los ntawm kev ntsuas enzymatic lossis mechanical thiab tswj kev loj hlob ntawm cov hlwb hauv cov khoom tsim nyog hauv cov iav lossis cov thawv yas hauv kev tswj hwm ib puag ncig. Cov cell hauv thawj kab lis kev cai muaj tib yam karyotype (tus naj npawb thiab cov tsos ntawm chromosomes hauv lub nucleus ntawm eukaryotic cell) raws li cov hlwb hauv cov ntaub so ntswg qub. Cov kab lis kev cai hauv lub cev tseem ceeb tuaj yeem muab faib ua ob yam raws li hom cell siv hauv kab lis kev cai.
Anchorage Dependent lossis Adherent Cell - Cov hlwb no xav tau kev txuas rau kev loj hlob. Adherent cells feem ntau yog muab los ntawm cov ntaub so ntswg ntawm lub cev, piv txwv li los ntawm lub raum qhov chaw uas cov hlwb tsis txav thiab kos rau hauv cov ntaub so ntswg
Anchorage Independent lossis Suspension Cells - Cov hlwb no tsis xav tau kev txuas rau kev loj hlob. Hauv lwm lo lus, cov hlwb no tsis txuas rau saum npoo ntawm kab lis kev cai. Tag nrho cov kab lis kev cai raug tshem tawm yog muab los ntawm cov hlwb ntawm cov ntshav; Piv txwv li, cov qe ntshav dawb lymphocyte raug tshem tawm hauv plasma
Cells tau los ntawm cov kab lis kev cai tseem ceeb muaj lub neej luv luv. Cells tsis tuaj yeem tuav tsis tau tas li vim muaj ntau yam laj thawj. Kev nce ntawm cov xov tooj ntawm tes hauv thawj kab lis kev cai yuav ua rau qaug zog ntawm cov substrate thiab cov as-ham. Tsis tas li ntawd, kev ua haujlwm ntawm tes yuav maj mam nce qib ntawm cov tshuaj lom metabolites hauv kab lis kev cai inhibiting cell loj hlob ntxiv.
Nyob rau theem no, yuav tsum tau ua theem nrab lossis subculture kom ntseeg tau tias kev loj hlob ntawm tes.
Dab tsi yog Secondary Cell Culture?
Raws li tau piav qhia saum toj no, thaum cov hlwb hauv cov kab lis kev cai nyob hauv txhua qhov muaj substrate lossis thaum cov hlwb hauv cov kab lis kev cai raug tshem tawm dhau lub peev xwm ntawm qhov nruab nrab los txhawb kev loj hlob ntxiv, cell proliferation pib txo lossis kom tag nrho. Txhawm rau kom muaj kev pom zoo ntawm cov xov tooj ntawm tes rau kev loj hlob txuas ntxiv thiab txhawb kev loj hlob ntxiv, thawj kab lis kev cai yuav tsum tau subcultured. Cov txheej txheem no hu ua kab lis kev cai thib ob ntawm tes.
Thaum lub sijhawm thib ob ntawm cov kab lis kev cai, cov hlwb los ntawm cov kab lis kev cai tseem ceeb tau hloov mus rau lub nkoj tshiab nrog qhov nruab nrab loj hlob tshiab. Cov txheej txheem cuam tshuam nrog tshem tawm cov xov xwm kev loj hlob yav dhau los thiab disassociating adhered hlwb nyob rau hauv thawj kab lis kev cai. Secondary cell culturing yog ib ntus yuav tsum tau muab cov hlwb nrog qhov chaw loj hlob thiab cov khoom noj tshiab, yog li, ua kom lub neej ntev ntawm cov hlwb thiab nthuav tawm ntau lub hlwb hauv kab lis kev cai.
Secondary culturing ib tug tej ntim ntawm ib tug thawj kab lis kev cai mus rau hauv ib tug sib npaug zos ntim ntawm tshiab loj hlob nruab nrab tso cai rau mus sij hawm ntev tu ntawm cell kab. Secondary culturing mus rau hauv ib tug loj ntim ntawm tshiab loj hlob nruab nrab yog xyaum ua kom cov cell, piv txwv li nyob rau hauv industrial processes los yog scientific thwmsim.
Dab tsi yog qhov txawv ntawm Primary Cell Culture thiab Secondary Cell Culture?
Raws li tam sim no peb tau nkag siab ob nqe lus sib cais, peb yuav muab ob qho piv rau txhawm rau pom lwm qhov sib txawv ntawm lawv.
Thaum Yuav Siv Lub Tsev Kawm Ntawv Qib Siab thiab/lossis Qib Kawm Qib Siab
Qhov no nyob ntawm seb koj xav kawm thiab hom kev sim koj ua.
Primary Cell Culture: Qhov no yog cov txheej txheem los siv rau kab lis kev cai hlwb los ntawm niam txiv cov ntaub so ntswg hauv kev txhawj xeeb. Cells nyob rau hauv thawj kab lis kev cai yuav muaj ib tug finite lifespan vim qaug zog ntawm substrate thiab cov as-ham thiab tsim cov co toxins, nrog rau cov pejxeem kev loj hlob. Thawj kab lis kev cai, txawm tias cov txheej txheem kev sib cais siv hauv cov txheej txheem kev cais tawm, tuaj yeem muaj ntau hom hlwb. Txawm li cas los xij, qhov no yuav tsis yog teeb meem hauv txhua hom kev sim thiab hauv cov xwm txheej zoo li no ib leeg tuaj yeem siv tau.
Secondary Cell Culture: Feem ntau, cov xov tooj ntawm cov hlwb tau los ntawm cov kab lis kev cai tseem ceeb tsis txaus hauv kev sim. Secondary cell kab lis kev cai muab lub cib fim rau expanding cell pej xeem thiab kuj, prolonging lub neej ncua. Nws ua rau muaj kev xaiv ntxiv ntawm cov hlwb nrog kev siv cov kev xaiv nruab nrab thiab tso cai rau genotypic thiab phenotypic uniformity hauv cov pejxeem. Cov txheej txheem no yog siv los tsim cov kab lis kev cai rov ua dua tshiab rau kev ua tus cwj pwm, kev khaws cia, thiab kev sim.
Raws li Parent Tissue
Primary Cell Culture: Cells rau thawj cell kab lis kev cai yog ncaj qha tau los ntawm ib tug tsiaj los yog cog cov ntaub so ntswg. Li no, cov hlwb hauv thawj kab lis kev cai zoo ib yam li nws niam nws txiv cov ntaub so ntswg thiab raws li, cov lus teb lom neeg yuav nyob ze rau qhov xwm txheej hauv vivo dua li ntawm cov kab lis kev cai thib ob ntawm tes.
Secondary Cell Culture: Secondary cell culture originates from a first cell culture. Txawm hais tias sub-culturing prolongs lub neej ntawm cov hlwb, nws muaj peev xwm hais tias tom qab ob peb theem, cov hlwb yuav hloov los yog tej zaum yuav poob tswj tsis faib ntau tshaj li ib lub sij hawm. Qhov no tuaj yeem yog vim kev hloov pauv lossis kev hloov pauv caj ces hauv cov hlwb thawj zaug thaum lub sijhawm ua haujlwm subculturing. Piv txwv li, qee cov kab mob zoo li hloov mus rau kab lis kev cai, uas feem ntau txawv ntawm lawv qhov chaw ib puag ncig, los ntawm kev hloov kho lawv cov kab mob biology.
Txheej Txheem Kev Ua - Tau txais Cells
Primary Cell Culture: Hauv thawj kab lis kev cai ntawm tes, tsiaj los yog cov ntaub so ntswg yuav mus txog theem ntawm kev yaug, kev txiav, thiab kev siv tshuab lossis kev sib cais ntawm cov enzymatic. Cov ntaub so ntswg disaggregated yuav muaj ntau hom cell sib txawv, thiab qhov no yuav xav tau kev saws los ntawm kev sib cais kom thiaj li cais cov hlwb ntawm kev txaus siab.
Secondary Cell Culture: Hauv cov kab lis kev cai thib ob, yog cov kab lis kev cai tseem ceeb yog kab lis kev cai, thawj kauj ruam yog tshem tawm cov hlwb los ntawm qhov txuas (nto ntawm kab lis kev cai nkoj) los ntawm kev siv tshuab lossis enzymatic. Tom qab ntawd, cov hlwb yuav tsum tau muab cais tawm ntawm ib leeg los tsim ib qho kev ncua ntawm tes.
Number of Cells in Culture
Primary Cell Culture: Nws tsis tsim nyog kom muaj ib qho kev ncua ntawm tes, vim tias ntau lub hlwb tseem muaj sia nyob zoo dua hauv cov pawg me.
Secondary Cell Culture: Nws txaus los tsim ib qho kev ncua ntawm tes.
Lub Neej Ntsuag ntawm Culture
Primary Cell Cultures: Cov kab lis kev cai ntawm lub cev tseem ceeb muaj lub neej tsis kawg. Raws li tau piav saum toj no, qhov no yog vim qhov kev loj hlob ntawm cov hlwb tso tawm cov substrate thiab cov as-ham thiab ua rau tsub zuj zuj ntawm cov tshuaj lom metabolites. Yog li ntawd, maj mam loj hlob ntawm cov hlwb poob, ua rau cov hlwb tuag.
Secondary Cell Culture: Secondary cell culture prolongs the lifespan of cells. Periodic sub-culturing tuaj yeem tsim cov hlwb tsis txawj tuag los ntawm kev hloov pauv lossis hloov caj ces ntawm cov hlwb thawj.
Risk of Contamination
Primary Cell Culture: Cov kab lis kev cai ntawm lub cev tseem ceeb yog qhov nyuaj rau kev saib xyuas. Feem ntau, cov kab lis kev cai tseem ceeb ntawm tes yuav tsum muaj kev sib xyaw ntawm cov amino acids, micronutrients, qee yam tshuaj hormones thiab kev loj hlob. Raws li qhov tshwm sim, qhov kev pheej hmoo ntawm kev kis kab mob hauv cov kab lis kev cai tseem ceeb hauv cov kab lis kev cai yog siab dua cov kab lis kev cai ntawm cov kab mob thib ob.
Cov Kab Mob Ntshav Qab Zib: Cov kab lis kev cai thib ob ntawm tes yog qhov sib piv tau yooj yim los tswj, thiab kev pheej hmoo ntawm kev kis kab mob tsawg dua li cov kab lis kev cai ntawm tes.
Nyob rau hauv tsab xov xwm no, peb tau sim nkag siab cov ntsiab lus thawj kab lis kev cai ntawm tes thiab kab lis kev cai thib ob ntawm tes ua raws li kev sib piv los qhia txog qhov sib txawv tseem ceeb ntawm lawv. Qhov sib txawv yooj yim nyob ntawm seb cov hlwb tau txais los ntawm kab lis kev cai; cov cell rau thawj kab lis kev cai ntawm tes yog tau ncaj qha los ntawm cov tsiaj los yog cov ntaub so ntswg, thaum cov cell rau cov kab lis kev cai theem nrab yog tau los ntawm ib tug twb tsim thawj kab lis kev cai.